微量移液器是用于精確測量少量液體的重要儀器??梢栽谌虮姸嘌芯繉嶒炇抑姓业降倪@種研究工具有多種形狀和大小。但是,盡管微量移液器有所不同,但它們都以相似的方式工作以精確測量微升液體。微型移液器與一次性吸頭一起使用,就像微型移液器一樣,它們具有各種尺寸。
所有的微量移液器都具有用于抽吸和分配液體的相同基本組件。柱塞位于移液器的頂部,根據(jù)其被壓下或釋放的位置用于抽出或排出液體。
體積調(diào)節(jié)刻度盤用于更改要傳輸?shù)囊后w的體積。
音量讀數(shù)顯示從上到下讀取。根據(jù)所使用的微量移液器,這些數(shù)字反映了您的體積測量中的不同數(shù)量級。在這里,您可以看到370微升的測量值。
一次性吸頭裝在微量移液器的底部。
吸頭彈出按鈕和吸頭彈出軸一起工作,以在需要丟棄移液器吸頭時將其彈出。
微量移液器系列包括幾個大小不同的成員,可轉(zhuǎn)移精確范圍的體積。
在這里,您可以看到該系列根據(jù)它們各自可以傳輸?shù)囊袅糠秶M(jìn)行排列。例如,Papa P-1000的輸送量為200-1000 µl,而一堆嬰兒P-2的輸送量為0.2-2 µl。
每個家庭成員都可以通過柱塞頂部的數(shù)字和顏色來識別,這清楚地表明了他們是誰以及可以輕松轉(zhuǎn)移多少體積。
有時,其他微量移液器的親戚也會出現(xiàn)在實驗中,例如P5000叔叔,Punt姨媽P100和Cousin P10。一起,這個擴展的家庭可以協(xié)助移動0.2-5000 µl的液體。
為了進(jìn)一步確保液體的精確準(zhǔn)確轉(zhuǎn)移,通常(但并非總是)將不同尺寸的移液器吸頭進(jìn)行顏色編碼,以便于識別,并用于不同尺寸的移液器。關(guān)于轉(zhuǎn)移的體積,白色微量移液器吸頭通常在0.5-2.5μl之間轉(zhuǎn)移,黃色吸頭為1-200μl,藍(lán)色吸頭為200至1000μl。
使用微量移液器時,shou先選擇要轉(zhuǎn)移體積的儀器。正確選擇移液器可能意味著成功或失敗實驗之間的差異。
shou先,將撥盤調(diào)整到所需的音量。要增加抽吸量,請沿逆時針方向旋轉(zhuǎn)刻度盤,將所需的量旋轉(zhuǎn)三分之一圈,然后緩慢減小至zui終刻度。要減小音量,請順時針轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)盤。
請記住,根據(jù)微量移液器,體積讀數(shù)中的這些數(shù)字具有不同的數(shù)量級。例如,在左側(cè),我們看到的是P1000,讀數(shù)為370 µl。千位為零,百位為3,十位為7。P200在右側(cè),顯示159 µl,百位為1,百位為5,百位為9。
設(shè)置好音量后,選擇一個吸頭。
現(xiàn)在,將微量移液器直立放置,將身體的狹窄部分放在手掌中,將懸垂物伸出食指,
用輕微的壓力將柱塞推到大約**個擋塊的一半處,或者當(dāng)您開始感覺到更大的阻力時。
此動作將移液器**的空氣排出。
按住柱塞,將針頭浸入樣品中1-3 mm之間。平穩(wěn)地將柱塞釋放回靜止位置,等待一秒鐘,讓液體移至吸頭,然后從樣品中取出移液器。
當(dāng)柱塞釋放回到靜止位置時,液體被吸入由排出的空氣產(chǎn)生的真空中。
檢查吸頭,以確認(rèn)吸出了所需量的液體,并且吸頭中沒有氣泡。
將樣品轉(zhuǎn)移到所需容器中時,將微量移液器以10-45°的角度緊靠接收容器的內(nèi)壁。這樣可以防止在**形成氣泡。要排出液體,請輕輕地將柱塞輕輕向下壓至**擋塊,開始分配液體,然后施加更大的阻力,將柱塞一直壓下至第二擋塊,以從**“吹出”zui后一點液體。
完全從容器中取出**,然后將柱塞釋放回靜止位置。
現(xiàn)在,使用彈出按鈕將移液器吸頭小心丟棄到適當(dāng)?shù)娜萜髦?。請注意您的操作,因為彈出?*可能會充當(dāng)彈丸,并可能傷害您的實驗室同伴。
為使微量移液器正常工作并保持內(nèi)部音量調(diào)節(jié)機制,切勿將音量撥盤置于微量移液器的特定范圍之上或之下。您可能會損壞樂器。
為避免樣品之間的交叉污染,每次轉(zhuǎn)移后都要更換吸頭。
使用微量移液器時,操作員的一致性很重要。平穩(wěn)的柱塞壓力將產(chǎn)生zui佳的實驗結(jié)果。zui后,請記住,要使微量移液器保持zui佳狀態(tài),請在不使用儀器時始終將其垂直放置。
既然我們已經(jīng)介紹了使用微量移液器的基本操作和原理,讓我們討論一些微量移液的常見實驗室應(yīng)用以及該儀器的變型。
微量移液器通常用于將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)板,以進(jìn)行各種實驗。
結(jié)合專用吸頭,可以使用微量移液器小心地加載樣品以進(jìn)行分析技術(shù),例如DNA凝膠電泳。
微量移液器也可用于機械破碎組織,以獲得單細(xì)胞懸液。
也可以在實驗室中找到基于空氣排量運行的微量移液器的變體。
中繼移液器允許在zui初抽吸較大體積的溶液后進(jìn)行連續(xù)較小體積的移液。移液器對于將相同體積的樣品轉(zhuǎn)移到大量容器中非常有用。
多通道移液器通常用于轉(zhuǎn)移20-200μl體積范圍內(nèi)的體積,并且有助于裝載整行96孔板。